تحقیق استاندارد روش اندازهگيري اوره و ازت آمونياكي در خوراك دام و طيور
دسته بندي :
دانش آموزی و دانشجویی »
دانلود تحقیق
لینک دانلود و خرید پایین توضیحات
دسته بندی : وورد
نوع فایل : word (..doc) ( قابل ويرايش و آماده پرينت )
تعداد صفحه : 22 صفحه
قسمتی از متن word (..doc) :
2
استاندارد روش اندازهگيري اوره و ازت آمونياكي در خوراك دام و طيور
1 ـ هدف
هدف از تدوين اين استاندارد تعيين روشهاي اندازهگيري اوره و ازت آمونياكي در خوراك دام و طيور ميباشد .
2 ـ دامنه كاربرد
اين استاندارد جهت اندازهگيري اوره و ازت آمونياكي در خوراك دام و طيور كاربرد دارد .
3 ـ نمونهبرداري
طبق استانداردهاي روش نمونهبرداري در مواد غذائي عمل شود .
4 ـ روش كار
4-1- اندازهگيري اوره به طريق اسپكتروفتومتري
4-1-1- وسايل مورد نياز
ـ اسپكتروفتومتر با حداكثر باند 2/4 در طول موج 420nm با سلهاي يك سانتيمتري
4-1-2- معرفها و مواد مورد نياز :
4-1-2-1- محلول پارادي متيل آمينوبنزالدئيد 1
16 گرم پارادي متيل آمينو بنزالدئيد را در يك ليتر الكل و 100 ميليليتر اسيد كلريدريك حل نمائيد . اين محلول براي يك ماده پايدار ميماند .
4-1-2-2- اسيد استيك
4-1-2-3- محلول استات روي : 22 گرم استات روي 2H2O 2(,OAC)Zn را در آب حل كرده و 3 ميليليتر اسيد استيك بآن اضافه نمائيد سپس آن را تا حجم 100 ميليليتر رقيق نمائيد .
4-1-2-4- محلول فروسيانور پتاسيم : 10/6 گرم فروسيانور پتاسيم 6 3H2O(,CN) K2Fe را در آب حل كرده و به حجم 100 ميليليتر برسانيد .
4-1-2-5- زغال اكتيو ـ (60 - G)
4-1-2-6- محلول بافر فسفات با 7 = PH
4-1-2-7- محلولهاي استاندارد اوره :
الف : محلول استاندارد اوليه با غلظت 5ml/mg
5 گرم اوره را با دقت يك ميليگرم در آب حل كرده و سپس آن را تا حجم يك ليتر برسانيد .
ب : محلولهاي استاندارد مورد استفاده با غلظتهاي 0/2 , 0/4 , 0/6 , 0/8 , 1 , 1/2 , 1/4 , 1/6 , 1/8 و 2 ميليگرم اوره در 5 ميليليتر : به ترتيب 2,4,6,8,10,12,14,16,18,20 ميليليتر از محلول اوليه (
2
5ml/mg) را برداشته و در بالن ژوژههاي 50 ميليليتري ريخته و هر كدام را با محلول بافر فسفات 7 به حجم برسانيد .
ج : محلول مرجع : محلول اوره استاندارد با غلظت 1/mg5ml را كه بشرح فوق تهيه گرديده بعنوان استاندارد مرجع بكار ببريد . اين محلول در حرارت كمتر از 24 درجه سلسيوس به مدت يك هفته ثابت ميماند .
4-1-3- رسم منحني استاندارد اوره :
از هر يك از محلولهاي استاندارد اوره ( طبق بند ب ) 5 ميليليتر برداشته و در لولههاي 25 ميليليتري ريخته و به هر كدام 5 ميليليتر محلول DMAB اضافه نمائيد و يك محلول شاهد نيز حاوي 5 ميليليتر محلول بافر 7 باضافه 5 ميليليتر محلول DMAB تهيه نمائيد . لولهها را كاملا تكان داده و بگذاريد 10 دقيقه در بن ماري 25 درجه سلسيوس بماند . سپس جذب هر يك از محلولها را در طول موج 420nm با استفاده از سلهاي يك سانتيمتري در مقابل شاهد ( با جذب صفر ) بخوانيد . آنگاه ميزان جذب محلولها را در مقابل غلظتها رسم نمائيد . منحني بدست آمده بايستي به صورت خط راست باشد در غير اين صورت آزمايش بايستي تكرار شده و محلول DMAB نيز تازه تهيه گردد .
4-1-4- روش اندازهگيري نمونه :
يك گرم از نمونه آسياب شده را وزن نموده و در يك بالن ژوژه 500 ميليليتري ريخته و بآن يك گرم زغال اكتيو و حدود 250 ميليليتر آب , 5 ميليليتر محلول استات روي و 5 ميليليتر محلول فروسيانور پتاسيم اضافه نمائيد . سپس مخلوط را به مدت 30 دقيقه كاملا با تكان دهنده تكان دهيد و پس از آن حجم آن را با آب به 500 ميليليتر برسانيد . آنگاه بگذاريد بماند تا رسوب ته نشين گردد . سپس آن را با استفاده از كاغذ صافي واتمن شماره 40 صاف كرده بطوريكه محلول صاف شده كاملاؤ شفاف باشد .
5 ميليليتر از محلول صاف شده را در يك لوله آزمايش ريخته و بآن 5 ميليليتر محلول DMAB اضافه كرده و كاملا تكان دهيد . همراه با نمونه يك محلول استاندارد مرجع ( طبق بند ج ) و يك محلول شاهد نيز تهيه نموده و آنها را در بنماري با حرارت 25 درجه سلسيوس به مدت 10 دقيقه قرار دهيد سپس ميزان جذب نمونه و استاندارد را در مقابل شاهد در طول موج 420nm قرائت نموده و درصد اوره را طبق فرمول زير محاسبه نمائيد .
= درصد اوره
3
A1 = ميزان جذب استاندارد مرجع
W = وزن نمونه بر حسب ميليگرم در حجم مورد آزمايش ميباشد .
4-2- روش اندازهگيري ازت اورهاي و آمونياكي در خوراك دام و طيور
4-2-1- وسايل مورد نياز
ـ بالنهاي كجدال با ظرفيت 500 ميليليتر
4-2-2- معرفها و مواد مورد نياز
4-2-2-1- محلول ضد كف
4-2-2-2- محلول كلرور كلسيم :
25 گرم كلرور كلسيم ( CaCl2 ) را در 100 ميليليتر آب حل نمائيد .
4-2-2-3- معرف متيل رد :
يك گرم متيل رد را در 200 ميليليتر الكل حل نمائيد .
4-2-2-4- اسيد كلريدريك نرمال
4-2-2-5- محلول سود نرمال
4-2-2-6- اوره خالص به فرمول شيميائي 2(NH2)Co)
4-2-2-7- محلول اوره آز :
محلول تازه اوره آز در آب را با غلظتي تهيه كنيد كه هر 10 ميليليتر محلول خنثي اوره آز , ازت موجود در 0/1 گرم يا بيشتر اوره خالص را تغيير دهد . براي اين منظور بايد ابتدا ميزان قليائيت و همچنين فعاليت آنزيم اوره آز تعيين گردد .
الف : تعيين قليائيت محلول اوره آز
ميزان قليائيت اوره آز تجارتي را بشرح زير تعيين نمائيد .
0/1 گرم از اوره آز را در 50 ميليليتر آب حل كرده و با محلول 0/1 نرمال اسيد كلريدريك در مقابل معرف متيل رد تيتره نمائيد . پس از بدست آوردن حجم اسيد كلريدريك 0/1 نرمال مصرف شده يعني ميزان قليائيت آنزيم , در موقع تهيه محلول اوره آز به ازاء هر 0/1 گرم اوره آز حل شده در آب , همان حجم اسيد كلريدريك 0/1 نرمال كه در بالا بدست آوردهايد , اضافه نمائيد و بدين ترتيب محلول خنثي تهيه شده است
ب : تعيين ميزان فعاليت آنزيم اوره آز
4
ابتدا يك محلول يك درصد خنثي اوره آز تهيه كنيد ( حدود 50 ميليليتر ) سپس چند نمونه 0/1 گرمي اوره خالص توزين نموده و به بالن كجدال منتقل نمائيد و به هر كدام از بالنهاي محتوي 0/1 گرم اوره خالص حجمهاي متفاوتي از محلول يك درصد اوره آز خنثي اضافه كنيد و مانند آنچه كه در روش آزمايش شرح داده ميشود مراحل هضم و تقطير را ادامه دهيد .
ميزان فعاليت اوره آز را از روي مقدار محلول اوره آزي كه اوره را به طور كامل تبديل كرده است محاسبه كنيد . تبديل كامل اوره آز از طريق بازيابي كامل ازت به وسيله تقطير تعيين ميگردد .
4-2-3- روش اندازهگيري نمونه مورد آزمايش
2 گرم نمونه را در بالن كجدال ريخته و حدود 250 ميليليتر آب و 100 ميليليتر محلول اوره آز بآن اضافه نمائيد . در بالن را كاملا بسته و بگذاريد يكساعت در حرارت آزمايشگاه و يا 20 دقيقه در حرارت 40 درجه سلسيوس باقي بماند . سپس خنك نمائيد .
( اگر نمونه بيش از 5 درصد اوره داشته باشد مقداري محلول اوره آز به آن اضافه كنيد .) سپس درب و گردن بالن را با چند ميليليتر آب شسته و حدود 2 گرم اكسيد منيزيم و 5 ميليليتر محلول كلروركلسيم و 3 ميليليتر ضد كف اضافه نمائيد . و عمل تقطير را در بالن كجدال انجام دهيد و در قسمت گيرنده حجم معيني اسيد كلريدريك نرمال قرار دهيد و عمل تقطير را ادامه داده تا حجم ظرف محتوي اسيد كلريدريك به 100 ميليليتر برسد آنگاه محلول اسيد را در مقابل متيل رد با سود نرمال تيتر نمائيد و ميزان ازت را طبق فرمول زير محاسبه نمائيد .
= درصد ازت اوره اي و آمونياكي
كه در آن :
A = حجم اسيد كلريدريك نرمال بكار برده شده
B = حجم سود مصرفي
خوراك دام و طيور و آبزيان-اكسيد منيزيم مورد مصرف در مكمل هاي معدني
ويژگي ها و روش هاي آزمون